慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响

被引：2

作者：

任凯 ^{[1
]}

崔云燕 ^{[2
]}

邵世滨 ^{[3
]}

张亚伦 ^{[4
]}

杨玲玲 ^{[4
]}

段珊 ^{[4
]}

丁岩 ^{[4
]}

崔行 ^{[4
]}

机构：

[1] 西安医学院生物化学教研室

[2] 济南市中心医院

[3] 山东医学专科学校

[4] 山东大学医学院生物化学与分子生物学教研室

来源：

中国病理生理杂志 | 2008年 / 24卷 / 12期

基金：

高等学校博士学科点专项科研基金;

关键词：

中性内肽酶; 慢病毒载体; β淀粉样肽; 细胞凋亡; 阿尔茨海默病;

D O I：

暂无

中图分类号：

R749.16 [];

学科分类号：

100203 ;

摘要：

目的:探讨脑中性内肽酶(NEP)外源表达对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法:采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ处理的SK-N-SH细胞,用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果:胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ,其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡,细胞存活率于感染病毒后48 h最强,为对照的170%(P<0.01),NEP活性组的凋亡率为3.86%,低于对照组的6.41%;RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达,抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论:NEP可以降解Aβ,可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。

引用

页码：2470 / 2474

页数：5

共 5 条

[1] 细胞外信号调节激酶在TPPB促进PC12产生可溶性淀粉样前体蛋白中的作用 [J].

杨红旗 ;

陈生弟 ;

巴茂文 ;

陆国强 ;

梁梁 ;

徐洁懿 .

中国病理生理杂志, 2008, (01) :24-27

[2] β淀粉样肽在阿尔茨海默症发病中的分子机制 [J].

孙丽文 ;

唐孝威 ;

胡应和 .

生物化学与生物物理进展, 2007, (01) :18-24

[3]

Neprilysin regulates amyloid β peptide levels[J] . Robert A. Marr,Hanjun Guan,Edward Rockenstein,Mark Kindy,Fred H. Gage,Inder Verma,Eliezer Masliah,Louis B. Hersh.Journal of Molecular Neuroscience . 2004 (1)

[4] Discussion of the role of the extracellular signal-regulated kinase-phospholipase A2 pathway in production of reactive oxygen species in Alzheimer's disease [J].

Andersen, JM ;

Myhre, O ;

Fonnum, F .

NEUROCHEMICAL RESEARCH, 2003, 28 (02) :319-326

[5]

Co-involvement of mitochondria and endoplasmic reticulum in regulation of apoptosis: changes in cytochrome c , Bcl-2 and Bax in the hippocampus of aluminum-treated rabbits[J] . Othman Ghribi,David A DeWitt,Michael S Forbes,Mary M Herman,John Savory.Brain Research . 2001 (1)

← 1 →