骨髓间充质干细胞治疗慢性后肢缺血机理的初步研究

被引:1
作者
杨盛家 [1 ]
陈兵 [1 ]
佟铸 [1 ]
张淑文 [2 ]
史小林 [3 ]
许晴 [3 ]
张斌 [1 ]
张建 [1 ]
机构
[1] 首都医科大学宣武医院血管外科
[2] 首都医科大学宣武医院再生医学实验室
[3] 首都医科大学解剖组织与胚胎教研室
关键词
骨髓间充质干细胞; 慢性后肢缺血; 机理; 线拴法; 大鼠;
D O I
暂无
中图分类号
R654.3 [血管];
学科分类号
1002 ; 100210 ;
摘要
目的利用细胞示踪技术探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗慢性后肢缺血的相关机理。方法采用密度梯度离心法结合直接贴壁法分离和培养大鼠MSCs,并以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记。采用线栓法制备8只Lewis大鼠慢性后肢缺血模型,将其随机均分为MSCs移植组和对照组,分别于患侧后肢肌肉注射MSCs和生理盐水。分别于移植术后第7天和第14天,对其进行临床观察、后肢血流量测定及后肢血管造影,再于相应时间点处死大鼠,取患侧后肢股四头肌和腓肠肌,行HE染色及BrdU免疫组化染色。结果移植术后14 d,8只大鼠全部成活,移植部位均无坏死和肿瘤形成;MSCs移植组大鼠患侧/健侧后肢的血流灌注比值明显增高(1.773比1.279),而血管造影结果提示2组大鼠的侧支血管数量比值未见显著增加(0.908比0.835)。HE染色结果示2组大鼠的股四头肌及腓肠肌并未发生特殊的病理学变化。BrdU免疫组化结果显示,阳性颗粒定位为股四头肌及腓肠肌的间质细胞和血管内皮细胞;且MSCs的分布存在差异,移植术后7 d腓肠肌内阳性细胞所占比例明显高于股四头肌,而14 d时则相反。结论 MSCs移植在术后早期可以提高血流灌注量,但这并非为增加了侧支血管数量使然,MSCs移植后所引起的旁分泌效应可能在术后早期起着重要的作用。
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