Aβ影响神经细胞中RXRα与Nur77的核质穿梭

目的探讨β淀粉样蛋白(Aβ)对维甲类X受体α(RXRα)、孤儿核受体Nur77的生成和亚细胞定位的影响。方法用Aβ25～35处理小鼠脑神经瘤细胞(N2a)细胞,并以阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的大脑皮层和海马组织为研究对象。应用实时荧光RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测N2a细胞和皮层、海马组织中RXRα、Nur77 mRNA表达和蛋白表达,应用核质分离结合Western印迹检测N2a细胞中RXRα、Nur77蛋白在细胞核与细胞质中的含量,应用免疫荧光技术观察N2a细胞与皮层、海马细胞中RXRα、Nur77的亚细胞定位;流式细胞仪检测N2a细胞凋亡情况,Western印迹检测Bcl-2和Bax表达量。结果 N2a细胞经Aβ处理24 h后,RXRαmRNA表达水平下降了16.47%,Nur77 mRNA表达水平无明显变化;RXRα、Nur77总蛋白量无明显变化,但RXRα与Nur77在细胞质中的含量分别由对照组的2.99%、3.91%增至处理组的21.4%、24.2%;Bcl-2蛋白表达下降,Bax表达量上升,细胞凋亡率从对照组1.23%增至Aβ25～35处理组18.69%;与对照小鼠比较,AD小鼠中RXRα、Nur77 mRNA表达水平在大脑皮层无明显差异,但在海马中分别增加了8.67%、11.73%;RXRα、Nur77总蛋白量变化无明显差异,但亚细胞定位发生改变,从细胞核迁移至细胞质增加并伴有凋亡发生。结论 Aβ可能诱导RXRα与Nur77从细胞核迁移至细胞质,诱发凋亡。