黄精多糖通过TLR4-MyD88-NF-κB通路抑制缺氧/复氧H9c2心肌细胞炎性因子释放

目的探讨黄精多糖（Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP）对缺氧/复氧（hypoxia-reoxygenation,H/R）诱导H9c2心肌细胞Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）-髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）-核因子-κB（nuclear factorκB,NF-κB）信号通路的调节作用。方法体外培养H9c2心肌细胞并随机分组:正常对照组（C组）、模型组（H/R组）、黄精多糖组（PSP组）、TLR4抑制剂（TAK-242组）和PSP+TAK-242组。C组细胞用正常培养液常规培养27 h;H/R组细胞进行缺氧21 h/复氧6 h处理;TAK-242组、PSP组和PSP+TAK-242组的细胞在缺氧培养21 h前分别加入含TAK-242、PSP和PSP+TAK-242的培养基培养12 h,在常规条件下复氧6 h。PSP和TAK-242的终浓度分别是1.5 g·L-1和1μmol·L-1。处理结束后,采用MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和白介素（interleukin,IL）-1β含量,Western blot检测NF-κB和inhibitorκBα（IκBα）的蛋白表达,荧光定量PCR法检测H9c2心肌细胞中TLR4、MyD88的mRNA表达。结果与H/R组比较,PSP组、TAK-242组和PSP+TAK-242组均能明显提高H/R损伤后心肌细胞的存活率,减轻其炎性因子渗出,明显下调NF-κB的表达,抑制H/R诱导的IκBα蛋白的降解,降低TLR4和MyD88基因的表达。结论 PSP保护H9c2心肌细胞H/R损伤的机制可能与抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路有关。