脂多糖对不同脑成熟程度早期新生鼠髓鞘发育的影响及肿瘤坏死因子-α表达变化

目的通过向2日龄（P2）、7日龄（P7）Wistar新生鼠腹腔注射相同剂量的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,采用2',3'环核苷酸3'磷酸二酯酶（2',3'-cyclic nucleotide phosphodiesterase,CNPase）和髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）分别标记未成熟少突胶质细胞和成熟少突胶质细胞,动态监测感染因素对两组新生鼠脑白质区髓鞘发育的影响,并检测这一过程中脑组织肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α表达的变化,探讨TNF-α在脑白质损伤（white matter damage,WMD）发生中的作用。方法将96只新生Wistar大鼠随机分为4组,每组24只,A组（P2新生鼠腹腔注射LPS5.0 mg/kg）,B组（P7新生鼠腹腔注射LPS 5.0 mg/kg）,C1、C2组（分别向P2或P7新生鼠腹腔注射等量生理盐水）。观察各组新生鼠脑组织病理变化,免疫组织化学技术测定给药后24 h脑组织CNPase蛋白表达变化及日龄14d（P14）脑组织MBP蛋白表达的变化,RT-PCR法测定给药后4h脑组织中'TNF-αmRNA表达的变化。结果 A组大鼠脑组织病理可见胼胝体区、外囊区灶性出血及侧脑室内出血,P14时胼胝体区可见软化灶,软化灶的周围可见胶质增生。而B组和C1、C2组脑白质区组织结构清晰,无明显的细胞增生和出血。A组脑室周围白质区阳性CNPase表达程度及面积较C1组弱（106.93±2.62vs 113.67±2.69,P<0.01）,B组染色程度及面积亦较C2组弱（96.37±1.82 vs 101.65±2.01,P<0.01）。P14时,与C1组相比,在胼胝体及放射冠区A组MBP染色明显减少（128.21±2.99 vs 134.81±2.98,P<0.01）,而B组较C2组无明显改变（134.77±3.68 vs 134.81±2.98,P>0.05）。给药后4 h,A组新生鼠脑组织中TNF-αmRNA表达相对值较B组增强（1.79±0.04 vs 1.18±0.04,P<0.01）。结论处于脑发育中的未成熟新生鼠腹腔注射LPS可对脑的髓鞘发育产生重要影响,导致髓鞘形成障碍或发育延迟,进而发生WID,TNF-α在WID发生时表达明显增加;而脑发育相对成熟的新生鼠则可抵御LPS的损伤,仅发生髓鞘发育的延迟而无明显的髓鞘形成障碍。