茵陈蒿汤通过FXR抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善胆汁淤积性肝损伤的机制

目的：研究茵陈蒿汤通过调控法尼醇X受体（FXR）抑制Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路改善胆汁淤积性肝损伤（CLI）的作用机制。方法：Wistar雄性大鼠40只，随机选取10只为空白组，其余大鼠复制α-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导的CLI模型。造模后随机分为模型组、熊去氧胆酸组(0.1 g·kg-1)、茵陈蒿汤组(9.23 g·kg-1)，每组10只，各给药组灌胃相应药物，连续3 d。检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、总胆汁酸（TBA）、总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）水平；肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝组织中FXR、TLR4、MyD88、NF-κB、小鼠含生长因子样模体黏液样激素样受体（F4/80）、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中FXR、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达；苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理学变化。结果：与空白组比较，模型组大鼠血清中ALT、AST、ALP、γ-GT、TBA、TBil、DBil水平显著升高（P<0.01），肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及mRNA表达显著升高（P<0.01），肝组织中FXR mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达、F4/80 mRNA表达显著升高（P<0.01）；肝组织病理可见炎性细胞浸润、胆管上皮细胞增生性改变。与模型组比较，熊去氧胆酸组大鼠血清中ALT、ALP、γ-GT、TBA、TBil、DBil水平明显降低（P<0.05,P<0.01），肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01），肝组织中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达、F4/80 mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01）；茵陈蒿汤组大鼠血清中ALT、AST、ALP、γ-GT、TBA、TBil、DBil水平明显降低（P<0.05,P<0.01），肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及mRNA表达显著降低（P<0.01），肝组织中FXR mRNA及蛋白表达明显升高，TLR4、MyD88、NF-κB、F4/80 mRNA及TLR4、NF-κB蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）；肝组织炎性细胞浸润减轻，胆管上皮细胞增生减少。结论：茵陈蒿汤对CLI具有明显的保护作用，其机制可能与调控FXR抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路介导的炎症反应有关。