藏药波棱瓜子总木脂素对ANIT诱导的小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨波棱瓜子总木脂素（TLHPS）对α-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导的小鼠肝内胆汁淤积（intrahepatic cholestasis,IC）型肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 将70只小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组、TLHPS各剂量组，各组连续给药7 d，在第5天给药2 h后，除正常组灌胃橄榄油溶液外，其余各组小鼠给予ANIT溶液造模。之后按照原剂量继续给药，造模48 h后，对各组小鼠进行摘眼球采血，并摘取肝脏。检测各组小鼠血清中肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、直接胆红素（DBIL）、总胆红素（TBIL）、总胆汁酸（TBA）；炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）及肝脏抗氧化应激因子谷胱甘肽（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）；采用HE染色检测肝脏病理变化；Western Blot法检测小鼠肝组织中NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组肝脏受损情况严重，ALT、AST、ALP酶活力明显升高（P<0.01）,DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显升高（P<0.01）,CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显降低（P<0.01）,NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与模型组比较，联苯双酯组及TLHPS各给药组ALT、AST、ALP酶活力明显降低（P<0.01）,DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显降低（P<0.01）,CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显升高（P<0.05,P<0.01）,NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）。与联苯双酯组比较，TLHPS(0.4 g·kg-1)组ALT、AST、ALP、TBA、TBIL、DBIL含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,TLHPS各给药组SOD含量明显降低（P<0.01）,TLHPS(0.05 g·kg-1)给药组JNK、p38、IL-1β蛋白表达水平明显上调（P<0.05,P<0.01）,TLHPS(0.4、0.2、0.1 g·kg-1)给药组NF-κB蛋白表达明显上调（P<0.05,P<0.01），其余各组差异均无统计学意义。病理切片显示TLHPS能改善肝脏受损情况。结论 TLHPS对IC型肝损伤存在保护作用，其作用机制可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB、NLRP3及JNK/p38MAPK通路，从而抑制炎症反应及改善小鼠肝脏氧化应激损伤有关。