血管生成素及其受体、血管内皮生长因子与糖尿病肾脏微血管病变的关系

目的探讨血管生成素(Ang)及其受体(Tie-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾脏中的表达变化规律,研究其与肾脏微血管结构变化的关系。方法将雄性成年SD大鼠分成糖尿病组和对照组,糖尿病组采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射造模。采用RT-PCR以及免疫组化技术,连续多时点观察肾脏Ang-1、Ang-2、Tie-2、VEGF以及血栓调节蛋白(TM-1)mRNA和蛋白表达变化规律,并分析其相关性。结果(1)糖尿病组Ang-1 mRNA于第4、8周时显著上调(吸光度A,83．58±10．23、88．59±6．97),第24周时低于对照组(47．13±8．02比64．53±8．77,P<0．05)。免疫组化显示Ang-1突出表达于肾小球,糖尿病组第4周后肾小球阳性染色明显强于对照组(A对数值, 4周1．64±0．12比1．08±0．16,24周1．24±0．11比1．11±0．17)。(2)糖尿病组Tie-2 mRNA在4～16周显著高于对照组(A,4周87．31±11．69比63．62±5．61,16周81．75±8．58比60．15±2．66)。免疫组化显示Tie-2突出表达于肾小球,糖尿病组各时点均显著高于对照组,高峰在4～8周。(3)糖尿病组仅在第16和20周时检测到明显的Ang-2 mRNA表达。免疫组化显示12周后仅在皮质区肾小管周围有Ang-2染色的微血管,而在第16周时最明显。(4)糖尿病组2～20周时肾小球TM-1染色显著高于对照组(A对数值,2周0．99±0．15比0．68±0．17,20周1．03±0．17比0．74±0．13),第24周时低于对照组,但差异无统计学意义。(5)糖尿病组VEGF mRNA和蛋白表达均较对照组明显升高。(6)糖尿病组Ang-1、Tie-2、VEGF。和TM-1相互间均呈正相关,它们与尿蛋白、肾重/体重、肾小球体积、肾小球面积也均呈正相关。结论(1)糖尿病肾脏存在VEGF、Ang及Tie-2表达的改变,早期Ang-1、Tie-2表达上调,后期下调并伴Ang-12表达上调。(2)Ang、Tie及VEGF的改变与糖尿病肾脏新生血管生成有关,其Ang-1下调和VEGF、Ang-2上调起重要作用。(3)糖尿病肾脏中后期皮质区肾小管周围已有Ang-2染色的新生微血管生成。