产harpin的成团泛菌工程菌的构建

被引:9
作者
赵立平
申泉
李艳琴
宁红秀
张晋丹
董汉松
徐文联
段明星
机构
[1] 山西大学生物工程实验室!太原,山西大学生物工程实验室!太原,山西大学生物工程实验室!太原,山西大学生物工程实验室!太原,山西大学生物工程实验室!太原,山东农业大学植保系!泰安刘爱新,山东农业大学植保系!泰安,清华大学生命科学与
关键词
成团泛菌(Pantoeaagglomerans); harpin; 工程菌;
D O I
10.13926/j.cnki.apps.1999.02.009
中图分类号
S432 [植物病害及其防治];
学科分类号
090401 ;
摘要
梨火疫病菌( Erwinia amylovora) 产生的胞外蛋白harpin 是引发其非寄主植物过敏反应的因子。harpin 蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌( Pantoea agglomerans)308R 对链格胞属( Alternaria) 的真菌具有拮抗活性,是一株抗利福霉素的自发突变株,对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌hrp 基因簇的重组质粒pCPP430 导入308R。所得转化子具有pCPP430 的壮观霉素抗药性标记,在番茄上引起过敏反应;从转化子中提取到与pCPP430 大小一样的质粒,其酶切物理图谱也与pCPP430 完全相同;用地高辛标记的harpin 的结构基因hrpN 为探针对转化子中的质粒进行Southern blot ting 分析,结果在转化子中得到信号明显的杂交片段,而受体菌308R 中未出现杂交信号;提取细菌的外壁的蛋白质进行PAGE 分析,在大约44 kd 的位置上308R(pCPP430) 比308R 明显多出1 条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的hrp 基因簇,所产harpin 蛋白也是有活性的
引用
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