白蒺藜醇甙对混合培养鼠视网膜神经节细胞的作用

被引:16
作者
叶长华
蒋幼芹
江冰
机构
[1] 湖南医科大学第二附属医院眼科!湖南长沙
关键词
视网膜神经节细胞; 细胞培养; 白蒺藜醇甙; 刺蒺藜;
D O I
暂无
中图分类号
R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
1008 ;
摘要
目的 :观察刺蒺藜单体成分白蒺藜醇甙 (tribulusfruitalcoholglycoside ,TFAG)对体外混合培养的鼠视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGCs)存活的影响 ,并筛选出其有效的药物浓度 ,同时与脑源性神经营养因子BDNF和碱性成纤维生长因子bFGF比较。方法 :采用胰酶消化法将 12只生后 2~ 3天的Sprague Dawley(SD)乳鼠视网膜制成细胞悬液 ,接种于鼠尾胶原包被的 96孔培养板中 (5× 10 4 个细胞 /孔 )。分为A组 (对照组 )和各种浓度梯度的TFAG实验组 :B组 (1× 10 -8g/L)、C组 (1× 10 -7g/L)、D组 (1× 10 -6g/L)、E组 (1× 10 -5g/L)、F组 (1× 10 -4 g/L)、G组 (1× 10 -3 g/L) ,在 37℃、5 %CO2 恒温培养箱中培养 ,于 1、3、5天 ,用MTT微量自动比色法测量存活细胞的吸光度A值。用Thy 1抗体、NSE抗体和GFAP抗体进行细胞免疫化学检查以鉴定RGCs。结果 :培养在鼠尾胶原上的细胞生长良好 ,大部分伸出突起。上述浓度的TFAG对培养细胞形态无影响。培养 1d ,C和D组吸光度 (A)值高于对照组 ,差异具有显著性意义 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;培养 3d ,仅D组吸光度 (A)值高于对照组 ,差异具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :TFAG具有类似神经营养因子的作用 ,能促进混合培养RGCs在体外的存活。TFAG是刺蒺藜主要有
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