HSP27对Hcy诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的研究热休克蛋白27(HSP27)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,采用MTT法检测Hcy对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)存活率的影响;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测Hcy及HSP27对细胞凋亡的影响;设计实验,采用总一氧化氮检测试剂盒(硝酸还原酶法)检测细胞培养液中NO水平、2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)活性氧(ROS)检测试剂盒及流式细胞术检测细胞内ROS来研究可能的保护机制。结果 HUVECs与不同浓度的Hcy作用后,0mmol/L组存活率均值为97.33%,Hcy 0.2mmol/L组存活率均值为95.17%,Hcy 0.4mmol/L组存活率均值为90.72%,Hcy 0.6mmol/L组存活率均值为78.29%,Hcy 0.8mmol/L组存活率均值为63.65%,Hcy 1.0 mmol/L组存活率均值为41.51%。0 mmol/L组与Hcy 0.2 mmol/L组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Hcy 0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L组存活率均低于0mmol/L组,差异有统计学意义(均P<0.05)。HSP27浓度越高,细胞的存活率越高,呈浓度依赖性,HSP27对HUVECs损伤具有保护作用。Hcy能够诱发内皮细胞凋亡,而HSP27能显著抑制这种凋亡,表明HSP27能减少Hcy对内皮细胞的损害。HSP27能抑制Hcy引起NO的减少和抑制Hcy诱导ROS的产生。结论HSP27通过影响NO表达和调节细胞内ROS水平保护Hcy诱导的受损伤内皮细胞。