短发夹状RNA介导的RNAi对白血病细胞株HL-60的抑制作用

被引：1

作者：

王琰 ^{[1
]}

孙玲 ^{[1
]}

赵国强 ^{[2
]}

王业生 ^{[1
]}

机构：

[1] 郑州大学第一附属医院血液科

[2] 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

来源：

肿瘤基础与临床 | 2007年 / 03期

关键词：

survivin基因; RNA干扰; 短发夹状RNA; 白血病; HL-60细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R733.7 [白血病];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的为探讨RNA干扰对HL-60细胞的抑制作用,构建survivin的短发夹状RNA真核表达载体并将其导入白血病细胞株HL-60细胞。方法设计、合成两对针对survivin的短发夹状RNA序列,连接到带有人U6启动子的载体质粒pSINsi-hU6中,将构建重组质粒命名为pSIN/shRNA1和pSIN/shRNA2。pSIN/shRNA1转染HL-60细胞,应用四唑盐(MTT)比色法观察细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果酶切分析和测序证实pSIN/shRNA1和pSIN/shRNA2构建成功。MTT测定显示转染重组质粒pSIN/shRNA1进入HL-60细胞48、72、96 h后细胞增殖明显受到抑制,分别与阴性对照组、空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪分析pSIN/shRNA1细胞凋亡率达(20.21±0.75)%,明显高于阴性对照组的(2.58±0.48)%和空白对照组的(1.26±0.30)%(P<0.05)。结论构建survivin基因RNAi真核表达载体成功;pSIN/shRNA1序列可特异性地抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡。

引用

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