银杏叶提取物对大鼠胰岛细胞获取和冻存的影响

背景:能否获取到足够的具有生物活性的胰岛细胞是影响胰岛细胞移植成功与否的主要原因之一,细胞冻存是收集足够胰岛的可行手段,但冻存复苏过程可引起细胞的凋亡。目的:观察银杏叶提取物对大鼠胰岛获取及冻存后功能的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/12在西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室完成。材料:选用成年SD大鼠40只用于分离提取胰岛细胞。方法:按随机数字表法将40只大鼠分为2组(n=20),银杏叶提取物组取胰腺前经尾静脉注射银杏叶提取物25mg/kg,获取胰岛后冻存,复苏后分别在含银杏叶提取物的培养基中培养3,7,14,21d(n=5)。对照组尾静脉注射等量盐水,冻存、培养时间同银杏叶提取物组。主要观察指标:电镜下观察胰岛细胞形态;应用原位末端标记法检测细胞凋亡情况;以免疫组化法检测Bcl-2表达。结果:①银杏叶提取物组胰岛细胞复苏损失率明显低于对照组(P<0.05)。②与对照组相比,银杏叶提取物组胰岛细胞复苏培养3d时内分泌颗粒及酶原颗粒增多明显。③银杏叶提取物组复苏培养21d后胰岛细胞仍可保持45%左右的存活率,对照组胰岛细胞存活率﹤35%,两组比较差异具有显著性意义(P<0.05)。④复苏培养7,14d,银杏叶提取物组胰岛细胞凋亡率低于对照组(P<0.05),Bcl-2表达高于对照组(P<0.05)。结论:银杏叶提取物能够减少胰岛冻存复苏的损失,阻止胰岛细胞的凋亡,从而保护了胰岛细胞的活性。