流式细胞术测定保存血小板再表达CD62p方法的建立及应用

被引：37

作者：

欧阳锡林

刘景汉

Dayong Gao

机构：

[1] 解放军总医院,解放军总医院,CollegeofMedicineinUniversityofKentucky北京,北京,Lexington,KenUSA

来源：

中国输血杂志 | 2002年 / 02期

关键词：

流式细胞术; CD62p; 再表达; 体内存活期; 线性相关分析; 凝血酶;

D O I：

10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2002.02.001

中图分类号：

R457 [血液疗法];

学科分类号：

100215 ;

摘要：

目的　①建立并优化测定血小板再表达膜表面激活标志物CD6 2p能力的流式细胞术 (FCM) ;②测定2 2℃保存液体血小板不同保存期再表达CD6 2p的能力 ,以评价该指标在血小板质量监测以及新的保存方法研究中的应用价值。方法　①采用浓度梯度法优化GPRP浓度条件 ,采用析因设计优化凝血酶浓度和 37℃孵育时间条件 ,寻找最佳阴、阳性对照 ;②将 13份血小板按AABB标准保存 ,并延长保存至 12d ,测定每天血小板CD6 2p再表达率 ,与其相应体内存活期作直线相关性分析。结果　①约 1.5× 10 6个血小板内加入 2 .5mmol/LGPRP可有效防止过量凝血酶诱导的聚集反应 ,孵育条件以 1U/L凝血酶 37℃ 15min然后室温置 15min最佳。采用新鲜富含血小板血浆(FPRP)为阴性对照 ,以凝血酶激活FPRP为阳性对照效果良好。② 2 2℃保存血小板CD6 2p再表达率与其相应体内存活期呈明显正相关 ,单份相关系数 (r) 0 .91～ 0 .99,总体相关系数为 0 .99。结论　①优化建立了一种灵敏简便 ,稳定性和重复性并好的流式细胞术方法用于测定保存血小板CD6 2p再表达率 ;②保存液体血小板CD6 2p再表达率与其相应体内存活期呈明显正相关 ,且相关性良好 ,提示CD6 2p再表达率是监测保存血小板质量的良好指标 ,同时还可能在新的保存方法研究和临床血小板功

引用

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页数：5

共 2 条

[1] 流式细胞术检测活化血小板 [J].

王建中，孙芾，王淑娟，杨振华，袁家颖 .

中华医学检验杂志, 1994, (04) :232-235

[2]

A monoclonal antibody directed against a granule membrane glycoprotein ( GMP-140/PADGEM, P-selectin,CD62p) inhibits ristocetin-induced platelet aggregation .2 Boukerche H,Ruchaud SM,et al. Br J Haematol . 1996

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