人β神经生长因子在大肠杆菌中的高表达

被引：2

作者：

张剑

张锡然

李朝军

张林元

柴建华

机构：

[1] 南京师范大学生物系,南京师范大学生物系,南京师范大学生物系,南京军事医学研究所分子遗传室,复旦大学国家重点实验室南京,南京,南京

来源：

微生物学报 | 1997年 / 06期

关键词：

人β申经生长因子; Huβ-NGF基因; 基因表达; rHuβ-NGF; 鸡胚背根神经节;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.1997.06.004

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

将编码人β神经生长因子(Huβ-HGF)的基因克隆到由T7噬菌体启动子控制的pET11c大肠杆菌表达载体中,重组质粒经鉴定含有Huβ-NGF基因,未解聚的表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),结果显示出二聚体27kD的蛋白带。而完全解聚的表达产物SDS-PAGE显示出一条13β5kD单体带。经凝胶电泳扫描,表达带占菌体总蛋白的14.5％。用兔抗鼠β—NGF的多克隆抗体进行的Western-Blot的结果表明,二聚体同单体都有免疫原性。在生物活性的鉴定中,菌体表达产物可以使小鸡鸡胚的背根神经节产生神经元突起,由此可以证明该表达产物有较高的生物活性。

引用

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