肾小管损伤时内皮素1、肿瘤坏死因子α的表达及其对离体肾间质成纤维细胞的影响

目的　研究内皮素１（ＥＴ １）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦα） 在肾小管上皮细胞的表达、肾小管的损伤及它们对肾间质成纤维细胞的影响。方法　应用肾小管上皮细胞及肾间质成纤维细胞的体外培养；建立肾小管损伤动物模型；应用逆转录 聚合酶链反应（ＲＴ ＰＣＲ） 、免疫组化ＳＰ法染色、放射免疫测定（ＲＩＡ） 及双重免疫组织化学染色技术，并测定３Ｈ ＴＤＲ 掺入率。结果　肾小管上皮细胞既有ＥＴ １ｍＲＮＡ和ＴＮＦαｍＲＮＡ 的表达（ＲＴ ＰＣＲ的扩增片段分别为５４６ ｂｐ 和４１５ ｂｐ） ，还有ＥＴ １ 及ＴＮＦ α的蛋白合成及分泌；细胞培养上清中ＥＴ １ 和ＴＮＦα含量分别为１．４２ ｐｇ／ｍｌ 和０ ．５８ ｎｇ／ｍｌ；且肾小管损伤及再生过程中，ＥＴ １ 及ＴＮＦα表达增加。对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞分别加入ＥＴ １ 、ＴＮＦα，３Ｈ ＴＤＲ掺入率较对照组明显增高（ Ｐ＜ ０．０５）；并证明肾间质成纤维细胞有ＥＴ受体（ＥＴ Ｒ） ｍＲＮＡ及ＴＮＦ受体（ＴＮＦ Ｒ１） ｍＲＮＡ的表达（ＲＴ ＰＣＲ 扩增片段分别为５４４ ｂｐ 和３４７ ｂｐ）。结论　损伤及再生的肾小管上皮细胞较正常时合成和分泌更多的ＥＴ １ 和ＴＮＦα，ＥＴ １ 及ＴＮＦα分别