D-半乳糖对大鼠骨髓间充质干细胞拟衰老作用的实验研究

被引：14

作者：

邢玉芝

杨玲麟

林洪

胡火珍

王有为

机构：

[1] 四川大学生命科学学院细胞生物学教研室

来源：

中国修复重建外科杂志 | 2006年 / 04期

关键词：

D-半乳糖; 骨髓间充质干细胞; 细胞衰老; 大鼠;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329 [人体组织学];

学科分类号：

100101 ;

摘要：

目的探讨D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)衰老后的形态学及生物学变化情况。方法取3只2月龄SD大鼠MSCs分离培养至第3代,一部分置于含8g/LD-gal的培养液中继续培养至第6代作为诱导组;另一部分在原培养液中继续培养至第6代作为对照组,并作表型鉴定。采用流式细胞仪检测对照组加入8g/LD-gal后4d内细胞周期的分布变化。两组MSCs培养7d并绘制生长曲线,在光镜和透射电镜下观察其形态和结构变化,β-半乳糖苷酶染色、单细胞凝胶电泳检测DNA损伤方法检测其衰老后的生物学行为变化。结果诱导组MSCs镜下呈典型的衰老细胞形态;对照组MSCs形态均匀,长势良好。流式细胞仪检测表明加入D-gal诱导后90%MSCs停留在G0/G1期,而S期和G2/M期MSCs趋于消失,并随诱导时间延长趋势越明显;对照组MSCs各期比例正常。MSCs生长曲线示诱导组生长速度较对照组明显减慢。诱导组约85%呈β-半乳糖苷酶阳性染色,对照组染色为阴性。单细胞凝胶电泳示诱导组MSCsDNA有拖尾现象,对照组MSCs无DNA损伤。结论D-gal对SD大鼠MSCs的老化具有诱导作用,初步推断8g/L为最适浓度,为研究MSCs衰老提供了较好的模型。

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页码：475 / 479

页数：5

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