改良的原代心肌细胞培养方法

被引:11
作者
王强 [1 ]
王东进 [1 ]
李庆国 [1 ]
朱凌云 [2 ]
机构
[1] 南京大学医学院附属鼓楼医院心胸外科
[2] 南京大学生命科学院
关键词
心肌细胞; 原代; 培养;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100101 ;
摘要
目的:探索原代心肌细胞培养的条件和方法,建立一套高效快捷的原代心肌细胞培养方案,为组织工程心血管相关研究提供心肌细胞来源。方法:实验于2006-04/07在南京大学生命科学院完成。出生2d内的SD大鼠8只,切取心肌组织,将其反复剪成约1mm3的块状,加入4mL消化液(0.8g/L的胰酶+2×105U/L胶原酶),然后收集细胞放在DMEM(pH7.2)培养基进行培养,以4×108L-1密度接种于培养瓶中,并置于37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱中。用4g/L台盼蓝染色检测心肌细胞的存活率,不着色者为存活细胞,并观察心肌细胞的形态学变化。结果:共计数800个细胞,其中42个染色阳性,成活率为95.89%。细胞培养未贴壁时心肌细胞呈圆形;24h后心肌细胞贴壁生长,细胞伸出伪足呈梭形、多角形;3~4d后形成细胞簇,并可出现同簇细胞的同步搏动,最后心肌细胞连接成片生长。结论:该心肌细胞培养方法存活率较高,是一种可靠的的心肌细胞培养方法。
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页码:1168 / 1169+1203 +1203
页数:3
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[1]   新生大鼠心肌细胞培养技巧 [J].
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余志斌 ;
谢满江 ;
车红磊 .
第四军医大学学报, 2003, (02) :92-92
[2]  
Transfer of macromolecules into living adult cardiomyocytes by microinjection[J] . Manuela Bartoli,William C. Claycomb.Molecular and Cellular Biochemistry . 1997 (1)
[3]  
Angiotensin II signalling pathways in cardiac fibroblasts: Conventional versus novel mechanisms in mediating cardiac growth and function[J] . David E. Dostal,George W. Booz,Kenneth M. Baker.Molecular and Cellular Biochemistry . 1996 (1)
[4]   COCULTURES OF FETAL AND ADULT CARDIOMYOCYTES YIELD RHYTHMICALLY BEATING ROD-SHAPED HEART-CELLS FROM ADULT-RATS [J].
WEISENSEE, D ;
SEEGER, T ;
BITTNER, A ;
BEREITERHAHN, J ;
SCHOEPPE, W ;
LOWFRIEDRICH, I .
IN VITRO CELLULAR & DEVELOPMENTAL BIOLOGY-ANIMAL, 1995, 31 (03) :190-195
[5]  
Serum-free, chemically defined medium to evaluate the direct effects of growth factors and inhibitors on proliferation and function of neonatal rat cardiac muscle cells in culture[J] . Takahiko Suzuki,Miyuki Ohta,Hiroyoshi Hoshi.In Vitro Cellular & Developmental Biology . 1989 (7)