H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达

被引：4

作者：

刘仁陆 ^{[1
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周佩娇 ^{[2
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朱事康 ^{[1
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任涛 ^{[2
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戴应基 ^{[1
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李炳清 ^{[1
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曹伟胜 ^{[2
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罗卓军 ^{[1
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程珏益 ^{[3
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郑世萍 ^{[1
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廖明 ^{[2
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机构：

[1] 惠州出入境检验检疫局

[2] 华南农业大学兽医学院

[3] 广东出入境检验检疫局

来源：

中国兽医科技 | 2005年 / 12期

基金：

国家科技攻关计划;

关键词：

禽流感病毒; H5N1亚型; NS1基因; 克隆; 表达;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2005.12.004

中图分类号：

S852.659.5 [];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析。结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B。再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1。经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白。用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性。

引用

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页数：4