内皮素对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成作用的实验研究附视频

目的　探讨内皮素 (ET)在瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成中的作用及一氧化氮(NO)、粉防己碱 (Tet)的拮抗效应。方法　体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,以3H TdR掺入法测定细胞增殖 ;以3H 脯氨酸掺入量判断细胞胶原合成。结果　ET呈浓度依赖性促进瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成 ,随着ET浓度 (2 5～ 10 0ng ml)的增加 ,3H TdR掺入值较对照组分别增加了 1 8、4 0和 4 9倍 ;3H 脯氨酸掺入值较对照组分别增加了 1 1、3 1和 3 8倍 (P <0 0 1)。用NO供体亚硝基乙酰青霉胺 (S nitroso N acetylpenicillamine ,SNAP) 5 0 μg ml单独处理成纤维细胞 ,对3H TdR掺入值无明显影响 (与对照组相比 ,P >0 0 5 ) ,但对3H 脯氨酸掺入值有下调作用 ;SNAP可拮抗ET 1(2 5ng ml)刺激细胞增殖作用 (抑制率为 2 2 89% ,P <0 0 5 ) ;对ET 1的促胶原合成作用无明显影响 (P >0 0 5 )。Tet在不抑制细胞DNA合成的药物浓度 (3μg ml)即可明显减少瘢痕成纤维细胞3H 脯氨酸掺入值 ,并能显著降低由ET介导的瘢痕成纤维细胞3H TdR掺入值 (抑制率为 33 2 1% ,P <0 0 1)。结论　ET对体外培养的瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成具有显著促进作用 ,此效应可部分被SNAP、Tet所阻抗。