raf-1基因高表达对鼠肾小球系膜细胞增殖表型的影响

目的探讨ｒａｆ １基因高表达对肾小球系膜细胞增殖的调控作用。方法应用细胞直接计数、流式细胞仪及特异底物磷酸化法分别检测ｒａｆ １基因转染细胞的增殖率、细胞周期分布及与细胞外信号调节的蛋白酶（ＥＲＫ）和ｃ ｊｕｎ蛋白酶（ＪＮＫ）的活性。结果ｒａｆ １基因高表达细胞早期生长正常，但于后期生长迟缓，细胞数目（２２．０±２．５）×１０５个／孔与对照组（３３．４±２．７）×１０５个／孔相比较显著减少（Ｐ＜０．０５）；细胞于生长第５天时停滞于Ｇ０／Ｇ１期（８１．３±３．７），（６２．３±２．４）％，（Ｐ＜０．０１），而Ｓ期细胞数量（８．３±０．９）％明显少于对照组（２７．０±１．５）％，（Ｐ＜０．０１）；其ＥＲＫ活性［（２１４±１６）ｐｍｏｌ·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１］显著高于对照组［（８２±９）ｐｍｏｌ·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１，Ｐ＜０．０５］，但ＪＮＫ活性则较对照组明显降低约５０％。结论在鼠肾小球系膜细胞中，Ｒａｆ １蛋白激酶确可作为ＥＲＫ的上游信号激活细胞增殖信号，但其持续高表达则能导致细胞生长周期停滞，这一作用很可能与ＪＮＫ活性抑制或细胞周期调控蛋白的变化有关。