TF-F Ⅶa复合物影响人卵巢癌细胞尿激酶型纤溶酶原激活物受体mRNA表达的研究

目的　克隆人组织因子 (TF) ,研究组织因子 活化凝血因子Ⅶ复合物 (TF FⅦa)对人卵巢癌细胞内尿激酶型纤溶酶原激活物 (u PA)及其受体 (u PAR)mRNA表达的影响 ,探讨该复合物在肿瘤浸润、转移中的作用机制。方法　采用分子克隆技术构建人TF真核表达载体pcDNA3 TFcDNA ;以脂质体介导转染人卵巢癌细胞系A2 780 ,筛选稳定表达的转染细胞A2 780 TF。以FⅦa分别刺激A2 780细胞和A2 780 TF细胞 ,采用RT PCR方法检测细胞内u PA及u PARmRNA水平变化。结果　①构建产物经基因测序证实为pcDNA3 TFcDNA重组体 ;②转染细胞A2 780 TF内TF mRNA水平显著增高 :转染细胞为 3.91± 0 .2 8,未转染细胞为 0 .97± 0 .2 3(P <0 .0 1) ;转染细胞表面TF表达显著增高 :转染细胞为(48 5 6± 9.5 3) %,未转染细胞为 (2 .73± 1.15 ) %(P <0 .0 1) ;③FⅦa刺激对A2 780细胞内u PA、u PARmRNA水平均无显著影响 ;④FⅦa呈浓度依赖性诱导A2 780 TF细胞内u PARmRMA水平增高 ,而不影响u PAmRNA水平 ;FⅦa刺激A2 780 TF细胞内u PARmRNA水平增高的作用具有一定的时相性 ;⑤抗TF单抗可阻断FⅦa诱导A2 780 TF细胞内u PARmRNA转录的作用。结论　TF通过与FⅦa形成复合物而上调人卵巢癌细胞内u PARmRNA的表达 ,可能藉此增强肿瘤侵袭及转