基质金属蛋白酶16在食管鳞癌中的表达及其生物学功能

背景与目的:中国是世界上食管癌的高发区,食管癌可发生早期淋巴结及血行转移,这使其表现出临床进展迅速并且预后很差的特性。研究显示癌组织侵袭和转移与其诱导产生的蛋白酶降解细胞外基质、基底膜能力密切相关,因此基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)在肿瘤的发生、发展、转移过程中发挥重要作用,本文研究基质金属蛋白酶16(matrix metalloproteinase-16,MMP-16)在食管癌中的表达及其与食管癌浸润转移的关系,并为食管癌早期诊断及靶向治疗提供理论依据。方法:应用免疫组化、蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RTPCR)检测食管癌及相应的正常组织的MMP-16蛋白表达水平和MMP-16 mRNA转录情况,并对其临床意义进行探讨。通过构建针对MMP-16的小片段发夹状RNA(shRNA)干扰表达质粒,应用划痕实验、Transwell小室实验、WST-1及流式细胞仪检测方法,研究shRNA表达质粒沉默MMP-16后对Eca109细胞的迁移、侵袭、增殖及凋亡水平的影响。采用t检验进行统计学分析。结果:在蛋白水平,MMP-16在癌组织和正常组织表达平均指数分别为0.569±0.380和1.483±0.982,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-16表达与食管鳞癌组织分化程度呈正相关(R=0.704,P<0.05),与肿瘤的分期负相关(P<0.05)。干扰MMP-16的表达后Ec109细胞侵袭及迁移能力明显增加(P<0.05),细胞凋亡水平下降,增殖差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MMP-16在食管癌组织中低表达,随着细胞分化程度增加而表达增加,在Eca109细胞中干扰MMP-16后能够抑制肿瘤细胞的迁移、侵袭,并减少凋亡水平,MMP-16在食管癌中可能起保护作用。