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胶原蛋白.[M].蒋挺大;张春萍著;.化学工业出版社.2001,
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生物化学实验原理和方法.[M].李建武等编;.北京大学出版社.1994,
重组类人Ⅰ型胶原蛋白分离与纯化
被引：2
作者：
马晓轩
范代娣
王晓军
米钰
机构：
[1] 西北大学化工学院,西北大学化工学院,西北大学化工学院,西北大学化工学院陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安
来源：
关键词：
重组类人Ⅰ型胶原蛋白;
分离纯化;
高密度发酵;
D O I：
10.16152/j.cnki.xdxbzr.2005.04.013
中图分类号：
R341 [];
学科分类号：
1001 ;
摘要：
目的研究重组类人Ⅰ型胶原蛋白基因工程的下游工艺。方法工程菌株Escherichia coliBL21 3.1在B ioengineering L1 523型12.8 L自控发酵罐中经24 h发酵,细胞干重达到77.3 g/L,表达量为菌体蛋白量的29.4%。发酵菌体经超声破碎、硫酸铵沉淀后,依次经DEAE52,Sephadex G-100柱层析分离纯化。结果最终产物纯度达到98%,回收率为80.5%。结论纯化的类人Ⅰ型胶原蛋白经SDS-PAGE电泳测定为电泳纯,分子质量为90ku,N端序列为NH2-H-D-P-V-V-L-Q-R-R-D-W-E-N-P-G,与基因序列设计一致。
引用
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