应用不同方法进行人牙髓细胞原代培养的比较研究

目的比较并建立人牙髓细胞原代培养的理想方法。方法分别采用组织块法、酶消化法和组织块消化法进行人牙髓细胞的体外原代培养,倒置显微镜及台盼蓝染色观察并比较三者的培养成活率、细胞活力、细胞形态和数量、培养耗时等,免疫组化法鉴定细胞来源。结果三种方法均可从人牙髓组织分离培养获得外胚间充质来源的牙髓细胞。组织块法耗时较长,4周能进行首次传代,传代成功率50%,细胞形态较单一;酶消化法能在较短时间内获得形态多样的人牙髓细胞,但培养成活率较低,且细胞数量较少,8天时传代成功率为20%;组织块消化法不仅培养成活率(75%)和8天传代成功率(62.5%)较高,而且在较短时间内可多量获得多种形态类型的人牙髓细胞。结论组织块消化法是一种更加科学可行的人牙髓细胞原代培养的优化方法,可为进行人牙髓干细胞的分离培养及特性研究提供实验方法学基础。