猪肝线粒体DNA的纯化及其限制酶切分析

被引:1
作者
胡华萃
周劲松
机构
[1] 杭州大学生物学系
[2] 杭州大学生物学系 届学生
关键词
肝脏; 线粒体DNA; 差速离心; 4%珠状琼脂糖凝胶; 限制酶;
D O I
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摘要
本文报道了一种纯化猪肝线粒体DNA(mtDNA)的简便方法.用差速离心制备线粒体,然后用1%Sarkosyl提取粗制的mtDNA,氯仿-异戊醇脱蛋白,最后用Sepharose4B凝胶柱层析纯化mtDNA.对纯化的mtDNA用化学分析、紫外吸收光谱、凝胶电泳和限制酶切等方法进行了鉴定.猪肝mtDNA经限制酶HindⅢ,HaeⅢ,HincⅡ,BamHⅠ和EcoRⅠ酶切分别切割成4,6,5,5和3个片断.经估算猪肝mtDNA的分子量约为15.85千碱基对或10.46×10~6道尔顿.
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