过表达Bcl-2雪旺细胞抗凋亡能力的实验研究

被引:9
作者
葛成国
靳凤烁
李黔生
江军
李彦锋
王洛夫
靳文生
机构
[1] 第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科重庆,,重庆,,重庆,,重庆,,重庆,,重庆,,重庆,
关键词
雪旺细胞; 凋亡; Bcl-2; 逆转录病毒; 过表达; 转染;
D O I
暂无
中图分类号
R651.3 [周围神经];
学科分类号
1002 ; 100210 ;
摘要
目的:探讨凋亡相关基因Bcl-2过表达对抗过氧化氢诱导的雪旺细胞凋亡的影响。方法:构建含有人Bcl-2cDNA的逆转录病毒真核表达载体PLXSN,脂质体法将重组质粒转染PA317细胞,G418筛选阳性克隆,鉴定后浓缩收集病毒液,感染人雪旺细胞株系Schwann'scells,采用Western法检测Bcl-2蛋白表达情况。5mMH2O2作用并诱导细胞凋亡后,流式细胞仪检测细胞凋亡发生变化。结果:成功构建出含目的基因Bcl-2的逆转录病毒表达载体pLBcl-2SN。5mMH2O2成功的诱导雪旺细胞凋亡。Bcl-2逆转录病毒感染雪旺细胞后,Bcl-2蛋白水平呈过高表达,并能显著对抗H2O2诱导的雪旺细胞凋亡。结论:Bcl-2蛋白过表达能够抑制氧化剂诱导的雪旺细胞凋亡。
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[1]  
分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著;金冬雁等译;.科学出版社.1992,