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一种简便、灵敏的ATPase活性测定法
被引：73
作者：
徐友涵
宋錴华
机构：
[1] 南开大学分子生物学研究所
[2] 南开大学分子生物学研究所 天津
[3] 天津 河北大学届生化专业毕业生
来源：
关键词：
复合物;
活性测定;
孔雀石绿;
Pi;
生化试剂;
反应溶液;
ATPase;
抗氧化剂;
柠檬酸;
酶促水解;
D O I：
暂无
中图分类号：
学科分类号：
摘要：
<正> 现有的ATPase活性测定方法是利用分光光度法,偶联丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的反应,测定NADH在340nm处光密度的减少,求出ATP的水解量,以及利用32γ-ATP同位素测定或用比色法测定ATP水解的Pi等,后一方法因实验条件简单,仍是最常用的分析方法。Fiske建立的钼蓝比色法虽经改进,灵敏度仍较低。Itaya发现磷钼酸与孔雀石绿生成的复合物,有很高的克分子消光系数,可用于灵敏测定Pi。但用于ATPase分析时,酸性钼酸催化的底物ATP非酶促水解,将严重干扰对酶活性的测定。Lanzetta利用柠檬酸淬灭新生Pi(如
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