蚯蚓纤溶酶原激活剂的分离纯化及其性质

被引:5
作者
严宜明
孔键
李红
石男
隋红艳
机构
[1] 赣南医学院,北京生物制品研究所,北京生物制品研究所,北京生物制品研究所,北京生物制品研究所赣州,北京,北京,北京,北京
关键词
赤子爱胜蚓; 纤溶酶原激活剂; 纯化; 纤溶活性; 丝氨酸蛋白酶;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2005.04.018
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
为了从赤子爱胜蚓中获得主要表现为纤溶酶原激活活性的蛋白酶,采用盐析、离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水吸附层析从蚯蚓组织匀浆中纯化出6种具有纤溶活性的酶组分(F1、F2、F3、F4、F5和F6).它们均为单一多肽链;表观分子量分别为28500、29500、26100、26300、14850和32800;经非还原型SDSPAGE和扫描仪扫描,纯度分别为100%、95.2%、96.5%、93.6%、98%和97.8%;等电点(pI)均不高于3;SDSPAGE后,用Schiff试剂染色显示F5为糖蛋白;纯化的6种酶于20℃~50℃保温1h,酶活力基本不变;F1和F2、F3和F4、F5和F6分别在pH4~10、4~11、7~12范围内稳定;水解BAEE试验及纤溶活性抑制试验表明,F6既是丝氨酸蛋白酶,又是含金属离子的蛋白酶,其它5种酶为胰蛋白酶样的丝氨酸蛋白酶;免疫双扩散试验结果初步表明,F1和F5以及它们和其它4种组分之间无共同的抗原决定簇;用纤维蛋白平板法及以ChromozymU和ChromozymPL为底物测定,除F1外,其余5种酶的纤溶酶原激活活性明显强于其直接纤溶活性.
引用
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