负载淫羊藿苷的丝素蛋白水凝胶促进腱骨愈合

背景：中药负载生物支架一直是近几年研究的热点及难点，构建载药复合生物支架材料为腱骨愈合提供了新的思路与方法。目的：探讨淫羊藿苷/羟基磷灰石/甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶促进腱骨愈合的作用。方法：(1)分别制备甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶(记为S水凝胶)、羟基磷灰石/甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶(记为S-H水凝胶)和淫羊藿苷/羟基磷灰石/甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶(记为S-H-I水凝胶)，表征水凝胶的微观形貌、理化性能、体外释药性能。(2)将MC3T3-E1细胞分别接种于与上述3种水凝胶表面，CCK-8法与活死染色检测细胞增殖与活性，细胞骨架染色观察细胞形态，成骨诱导后进行碱性磷酸酶染色与茜素红染色。(3)取18只新西兰兔，沿左侧股骨及胫骨端起止点剪断原生前交叉韧带构建骨损伤模型，沿前交叉韧带起止点做直径3 mm、长10 mm的骨隧道，随机分3组干预：空白对照组(n=6)骨隧道不植入任何材料，对照组(n=6)骨隧植入S-H水凝胶，实验组(n=6)骨隧植入S-H-I水凝胶。术后4,8周取材，分别进行苏木精-伊红染色与Msaaon染色。结果与结论：(1)3组水凝胶均具有疏松多孔结构，微观形貌相似，其中S水凝胶孔径最大，S-H-I水凝胶孔径最小，3组水凝胶均表现出先快后慢的溶胀和降解特性；S水凝胶的压缩模量最大，S-H水凝胶的压缩模量最低；S-H-I水凝胶中的淫羊藿苷呈初始快速释放和后期缓慢释放特征。(2)CCK-8与活死染色显示，S-H-I水凝胶可促进MC3T3-E1细胞增殖并保持细胞活性；细胞骨架染色显示，S-H-I组细胞密度最高，骨架结构完整且清晰，细胞间相互连接；碱性磷酸酶染色和茜素红染色显示，S-H-I水凝胶的促成骨能力最强。(3)苏木精-伊红染色与Msaaon染色显示，相较于S-H水凝胶，S-H-I水凝胶可进一步促进腱骨损伤部位细胞的有序排列和组织构建、减少炎性细胞浸润、促进胶原纤维成熟和有序排列。(4)结果表明，淫羊藿苷/羟基磷灰石/丝素蛋白水凝胶具备良好的力学性能、生物相容性和成骨诱导能力，可促进腱骨愈合。