背景：糖皮质激素能够显著抑制人股骨头骨微血管内皮细胞中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol3 kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关蛋白的表达，从而触发细胞的程序性死亡和坏死过程。已有证据表明谷氨酰胺能够激活PI3K/Akt/mTOR信号通路。目的：探究谷氨酰胺对糖皮质激素诱导骨微血管内皮细胞凋亡的影响。方法：从SD大鼠双侧股骨头中分离提取骨微血管内皮细胞，取传代第3代骨微血管内皮细胞，培养12 h后分4组处理：对照组常规培养24 h，糖皮质激素组加入甲基泼尼松龙琥珀酸钠处理24 h，糖皮质激素+谷氨酰胺组加入甲基泼尼松龙琥珀酸钠处理12 h后添加谷氨酰胺处理12 h，糖皮质激素+谷氨酰胺+LY294002组加入甲基泼尼松龙琥珀酸钠处理12 h后添加谷氨酰胺处理6 h，再加入PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002处理6 h。培养结束后，AO-PI双重荧光染色及Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，RT-qPCR检测BCL-2、Bax、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达，Western Blot检测BCL-2、Bax、PI3K、Akt、m TOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果与结论：(1)糖皮质激素组细胞凋亡率高于对照组、糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)，糖皮质激素+谷氨酰胺+LY294002组细胞凋亡率高于糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)；(2)糖皮质激素组BCL-2、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达低于对照组、糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05),Bax mRNA表达高于对照组、糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)；糖皮质激素+谷氨酰胺+LY294002组BCL-2、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达低于糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05),Bax mRNA表达高于糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)；(3)糖皮质激素组BCL-2、PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达低于对照组、糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05),Bax蛋白达高于对照组、糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)；糖皮质激素+谷氨酰胺+LY294002组BCL-2、PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达低于糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05),Bax蛋白表达高于糖皮质激素+谷氨酰胺组(P<0.05)；(4)结果表明，谷氨酰胺通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路减少糖皮质激素诱导的骨微血管内皮细胞凋亡。
