绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜的促成骨效应

背景：绿原酸具有抗菌、抗病毒、促成骨等作用，但水溶性较差限制了其生物活性。目的：观察绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜的促成骨效应。方法：(1)以绿原酸、牛血清蛋白和壳聚糖为原料，通过去溶剂法和静电吸附技术制备绿原酸蛋白微球。表征绿原酸蛋白微球的微观形貌、粒径大小、Zeta电位与药物包封率。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分3组培养：对照组不进行任何处理，绿原酸组加入10 mg/L绿原酸，绿原酸蛋白微球组加入50 mg/L绿原酸蛋白微球，检测细胞增殖、成骨诱导后的碱性磷酸酶活性以及过氧化氢诱导氧化应激下的活性氧水平。(2)利用静电纺丝技术分别制备聚己内酯静电纺丝膜与绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜，扫描电镜观察静电纺丝膜的微观形貌。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分4组培养：对照组不进行任何处理，绿原酸组加入10 mg/L绿原酸，聚己内酯组加入聚己内酯静电纺丝膜，微球纺丝膜组加入绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜，成骨诱导7 d后，RT-qPCR检测RUNX2、碱性磷酸酶mRNA表达，Western blot检测RUNX2、碱性磷酸酶蛋白表达。结果与结论：(1)绿原酸蛋白微球为表面光滑的双层结构，粒径较为均一，平均粒径(322.38±8.39) nm,Zeta电位为(42.85±2.11) mV，药物包封率为(57.16±7.32)%。绿原酸与绿原酸蛋白微球均可促进MC3T3-E1细胞增殖与早期成骨分化，降低氧化应激反应的活性氧水平。(2)两组静电纺丝膜均为孔隙较多的3D网状结构，聚己内酯静电纺丝表面较光滑，纺丝直径也较为一致，绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜表面出现较多球状突起，纺丝直径差异较大。绿原酸与绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜均可提高MC3T3-E1细胞内RUNX2、碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达。结果表明，绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜可促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。